磁珠作為化學發(fā)光試劑的關鍵原料,直接影響化學發(fā)光試劑的產(chǎn)品質量,考察磁珠性能一般通過非特異吸附、粒徑及均勻程度、不同類型及不同濃度的選擇幾種常用方向作為切入點。化學發(fā)光試劑常用的磁珠一般粒徑在1μm-10μm之間,大多數(shù)IVD廠商都是通過顯微鏡或者納米粒度儀來檢測磁珠的粒徑,然而顯微鏡需要測試干燥狀態(tài)下的樣品,無法對顆粒在溶液中的真實狀態(tài)進行表征分析,且視野內數(shù)量有限,很難對異常情況做出的分析,非??简炑邪l(fā)人員的經(jīng)驗,另外好的顯微鏡法儀器價格不菲。納米粒度儀雖然可以對磁珠粒徑很好的檢測,但是密度較大,粒徑1μm或以上的磁性微球由于在溶液中沉降速率過快,影響布朗運動,因此測試可能存在一定偏差。
故而如何獲得真實的磁珠粒徑,尤其是當科研人員想要分析顆粒在特定溶液是否聚集,觀察不同緩沖體系或者制備過程中磁珠粒徑的變化,便尤為艱難。基于以上困境,奧博士為大家?guī)砹嗣绹鳳SS粒度儀公司的AccuSizer A7000 SIS儀器,通過的單顆粒光學傳感技術(SPOS),解決了磁珠的粒徑檢測問題,還可以進一步定量顆粒數(shù)量信息。
接下來我們來看一下SPOS技術的儀器AccuSizer A7000 SIS為何適合磁珠粒徑的檢測
1.檢測結果與顯微鏡下的結果可直接對應:
選取Dynabeads™的1μm和2.8μm磁珠,通過AccuSizer A7000 SIS檢測,并于顯微鏡的結果進行對照。
表一 Dynal 1μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 譜圖 | 顯微鏡 |
表二 Dynal 2.8μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 譜圖 | 顯微鏡 |
2.定量磁珠顆粒數(shù)量信息:
AccuSizer A7000 SIS在檢測出粒徑分布的同時,還可以給出不同粒徑之間顆粒數(shù)量,累計數(shù)量,數(shù)量占比甚至體積占比等等信息。
圖三 AccuSizer A7000 SIS 全通道數(shù)據(jù)(局部)
3.儀器重現(xiàn)性優(yōu)良:
通過配置不同濃度的樣品,將結果疊加,可以看到不同濃度的樣品,主峰粒徑以及緩沖體系中游離的雜質不僅能的檢測出來,并且數(shù)量分布走勢一致。
圖四 配置不同濃度樣品的檢測結果
了解了AccuSizer A7000 SIS的優(yōu)點,科研人員到底應該如何使用,下面我們通過幾個簡單的對比,來進行初步的了解。
1.包被前后粒徑的差異
圖五 Dyanl 2.8μm 羧基 包被后(紅)
2.過期前后粒徑的差異
圖六 國內某品牌過期前(紅)與過期后(藍)
3.國內外廠家粒徑的差異
表三 配置不同濃度樣品的檢測結果
國外A廠粒徑分布 | 國內某廠粒徑分布 |
磁珠的粒度檢測會受到很多因素的影響,從而對檢測結果造成影響。AccuSizer 780 A7000 SIS能輕松檢測其粒度,檢測結果不僅給出粒度分布,也可以量化不同粒子的數(shù)量。結果可靠及。